实验室内常用的连接外源性DNA载体DNA的酶是： A、Taq酶 B、T4D

Freeti2020-05-20 49

问题实验室内常用的连接外源性DNA载体DNA的酶是：A、Taq酶 B、T4DNA连接酶 C、DNA聚合酶I D、DNA聚合酶Ⅱ E、DNA聚合酶Ⅲ

选项

答案B

解析外源DNA片段和线状质粒载体的连接，也就是在双链DNA5'磷酸和相邻的3'羟基之间形成的新的共价链。如质粒载体的两条链都带5'磷酸，可生成4个新的磷酸二酯链。但如果质粒DNA已去磷酸化，则吸能形成2个新的磷酸二酯链。在这种情况下产生的两个杂交体分子带有2个单链切口，当杂本导入感受态细胞后可被修复。相邻的5'磷酸和3'羟基间磷酸二酯键的形成可在体外由两种不同的DNA连接酶催化，这两种酶就是大肠杆菌DNA连接酶和T4噬菌体DNA连接酶。实际上在有克隆用途中，T4噬菌体DNA连接酶都是首选的用酶。这是因为在下述反应条件下，它就能有效地将平端DNA片段连接起来。

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